作者：陈婧 窦颖
单位：罗氏诊断（上海）有限公司
脂蛋白（a）[Lp(a)]是血脂家族中的一员，由低密度脂蛋白（LDL）样微粒和载脂蛋白（apo）（a）构成。有很多大规模研究证实Lp(a)升高是CVD的高危因素之一，但目前将其作为CVD的预测因子，及用于临床并作为防治干预靶点，仍然存在很多问题。其中重要的一个原因是，Lp(a)分子大小差异很大，及缺乏可溯源的校准试剂，因此，其检测方法尚未完全标准化。本文对Lp(a)的结构、遗传特点、检测方法及其在CVD的疾病管理中的重要进展进行了论述。
一、Lp(a)的生物学特征
Lp(a)由低密度脂蛋白（LDL）样微粒和载脂蛋白（apo a）构成。虽然Lp(a)的结构与LDL相似，均含有apo B100，但Lp(a)还含有第2种载脂蛋白——apo（a）。apo（a）借助二硫键与apo B100非共价结合，在Lp(a)的功能上发挥着重要作用[1]。
Apo（a）是由肝细胞分泌的亲水性糖蛋白，是由无活性的丝氨酸蛋白酶和高度糖基化的三环状环饼（kringle）结构域构成。Apo（a）的KⅣ结构有10种亚型（KⅣ-1～KⅣ-10），除KⅣ-2型为多拷贝外，其余均为单拷贝。KⅣ-2型的拷贝数由遗传因素（LPA基因）决定，从2～40多个拷贝不等，由于这段环饼数的变化 ，导致apo（a）多肽链长度具有高度异质性，使Lp(a)颗粒大小不一。KⅣ-2型的拷贝数越大，apo（a）的肽链越长，蛋白合成、加工、分泌所需的时间越长，致使血浆中的Lp(a)水平越低；反之，Lp(a)水平越高。流行病学研究发现，人群中的Lp(a)水平呈偏态分布，而Lp(a)在不同种族与地区间具有明显差异，黑种人Lp(a)水平较高，是其他种族人群的2～3倍[2]。
二、Lp(a)检测的标准化
检测血浆Lp(a)水平目前有2种途径：一是通过测Lp(a)内的蛋白质成分[apo（a）、apo B100]，推算Lp(a)的含量或浓度；二是检测Lp(a)内胆固醇成分，采用脂蛋白（a）胆固醇[lipoprotein（a）cholesterol，Lp(a)-C]表示Lp(a)水平。目前的检测方法多采用前者，实验室多以免疫学方法为主，常用的检测方法主要包括免疫透射比浊法（ITA）、免疫散射比浊法（INA）、荧光试验和酶联免疫吸附试验（ELISA）等，所选用抗体为抗 apo（a）抗体和抗 apo B100 抗体。
Lp(a)的报告单位通常为mg/dL，代表整个Lp(a)的质量（包括蛋白、脂质和碳水化合物）。但是，这些测定方法必须使用参考物质验证，因为尽管其使用不受 apo（a）大小影响的单克隆抗体，但校准品由apo（a）分子大小的异质性大小差异导致了偏差。
除了各个试剂盒的分析性能不同外 ，国际上缺少公认的以血清为基础的二级参考标准是重要因素。鉴于Lp(a)测定方法之间的可比性很差是标准化的主要问题，所以国际临床化学和检验医学联合会（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）Lp(a)标准化工作组已经启动了选择合适的Lp(a)二级参考物质的计划。2003年11月，WHO确定IFCC SRM 2B为Lp(a)免疫测定国际参考物质，完整的名称为WHO/IFCC SRM 2B[3]。IFCC 标准化工作组建议 Lp(a)测定方法必须使用已经过验证的、不受apo（a）大小差异影响的方法，这些方法测定Lp(a)的单位为apo（a）蛋白的摩尔数，使用特异的单克隆抗体和不受apo（a）大小影响的特异抗体 。
罗氏Tina-quant Lipoprotei（a）Gen 2是首个遵循EAS指南进行了nmol/L标准化的产品，溯源至IFCC/WHO SRM2B及参考ELISA方法，采用颗粒增强免疫比浊法，其检测的是Lp(a)的颗粒浓度而非分子质量，这种方法可准确地检测Lp(a)的微粒个数，不受多态性多少的影响，能够带来真正准确的Lp(a)水平检测值。
