在没有条件开展同工酶电泳的情况下,可采用电化学发光法测定CK-MB mass,以明确患者是否存在CK-MB升高。电化学发光法的反应原理,是采用生物素-链霉亲和素技术,以顺磁性微粒为固相载体,使用CK-MB单克隆抗体,三联吡啶钌作为发光物质,反应时形成生物素-抗体-抗原-抗体-钌复合物。被磁珠所捕获的三联吡啶钌在电场作用下得失电子,从而由稳定的基态转为激发态,当激发态回到基态发出光信号。采用单克隆抗体,除具有抗原抗体反应的特异性外,与其同工酶CK-BB及CK-MM无交叉反应,而且不受血清中其他酶类、蛋白物质的干扰,在特异性、灵敏度均优于免疫抑制法测定CK-MB活性。如CK-MB mass可间接证明免疫抑制法酶活性检测结果受到干扰。
3、热失活试验
将可疑血清置45 ℃水浴20 min,测定CK残余活性,CK-MB和CK-BB几乎完全失活,而巨CK则不受影响[7]。
4、其他方法
如想鉴别巨CK1是何种Ig复合物类型,可采用抗Ig亚型的抗体温育沉淀进行鉴别,与抗IgA或IgG温育后原有的异常条带减弱或完全消失或出现新的条带则提示巨CK1涉及IgA或IgG,巨CK2无任何改变。几种方法鉴别标准如下表所示[7]:
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案例处理结果
对上述案例的血清标本,补充检测CK同工酶电泳,结果显示患者存在明显的巨CK1条带[8](图4),表明患者的CK-MB活性>CK活性的情况主要是由巨CK1引起。将该患者的特殊情况与临床进行沟通,并在报告中给出解释性说明。
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图4 CK同工酶电泳分析结果
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图5 CK同工酶倒置报告注释
总结
日常工作中如果出现CK和CK-MB活性倒置或怀疑CK-MB假性升高时,需积极与临床做好解释沟通,可建议补充检测“CK-MB质量”以排查干扰因素。如果实验室条件允许的情况下,可进一步采用同工酶电泳等方法,判断导致CK-MB假性升高的具体原因(图5)。
参考文献
[1] Joseph Lopez. Carl A. Burtis and David E. Bruns: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 7th ed.[J]. Indian Journal of Clinical Biochemistry,2015,30(2).
[2] Kindermann W . Creatine Kinase Levels After Exercise[J]. Deutsches Ärzteblatt International, 2016, 113(19):344.
[3] Halkin A , Stone G W , Grines C L , et al. Prognostic Implications of Creatine Kinase Elevation After Primary Percutaneous Coronary Intervention for Acute Myocardial Infarction[J]. Journal of the American College of Cardiology, 2006, 47(5):951-961.